Azot jest gazem szeroko stosowanym w produkcji wraz z tuzinem innych związków obojętnych. Nie zawsze wskazane jest transportowanie lub przechowywanie tego gazu w czystej postaci, a czasami wystarczy określić jego obecność w substancji. W tym celu stosuje się metodę Kjeldahla. Metoda Kjeldahla polega na tym, że azot zawarty w bezbiałkowej filtrowanej cieczy podczas reakcji spalania z kwasem siarkowym jest przekształcany w amon. Powstały amoniak jest uwalniany swobodnie po reakcji alkalicznej.
Instrukcje
Krok 1
Do analizy weź 4 ml krwi, osocza lub surowicy, rozcieńczyć 8 ml wody destylowanej. Do tej samej kolby dodać 8 ml kwasu trichlorooctowego. Dobrze wymieszaj roztwór i przefiltruj.
Krok 2
Do kolby destylacyjnej wlej 5 ml przefiltrowanej cieczy, która domyślnie będzie zawierała 1 ml analizowanej krwi. Dodaj tam 1 ml odczynnika nr 2, podgrzej kolbę na małym płomieniu, aż pojawi się biała para.
Krok 3
Ustawić kolbę w taki sposób, aby jej dno lekko dotykało płomieni. Proces spalania uważa się za zakończony, gdy ciecz staje się niebieskawa lub bezbarwna.
Krok 4
Odstaw kolbę na bok do ostygnięcia. Wystarczy półtorej do dwóch minut. W przeciwnym razie powstaje nierozpuszczalny osad.
Krok 5
Wlej wodę po ścianie, przepłukując nią lejek. Wstrząsnąć do wymieszania, w razie potrzeby podgrzać kolbę.
Krok 6
Złóż urządzenie, podłącz odbiornik. Umieścić 10 ml 0,01 N. do odbieralnika. roztwór kwasu siarkowego. Dodaj jedną lub dwie krople metylorothu. Po połączeniu wszystkich składników do odbiornika podłącz pompę strumieniową.
Krok 7
Rozpocznij przepuszczanie powietrza przez preparat, wlej 33% wodorotlenek sodu do części destylacyjnej, aż płyn zmieni kolor z bezbarwnego na ciemnoniebieski lub ciemnobrązowy. Wskazuje to na reakcję alkaliczną.
Krok 8
Zatrzymaj destylację po dziesięciu minutach. Zamknąć kran pompy strumieniowej, otworzyć korek odbiornika, wypłukać kwas siarkowy z końca rury chłodniczej. Wymień na inny odbiornik o tej samej objętości 0,01N. roztworem kwasu siarkowego, wykonaj drugą destylację.
Krok 9
Dodaj sodę kaustyczną do pierwszego pojemnika, aż do uzyskania stabilnego żółtego koloru przez 30 sekund.
Krok 10
Wniosek: 1 ml 0,01 N. kwas siarkowy lub wodorotlenek sodu odpowiada 0,14 mg azotu.
Różnica pomiędzy ilością kwasu siarkowego umieszczonego w odbiorniku a ilością wodorotlenku sodu pobranego podczas miareczkowania, wytworzona przy 0,14 mg, jest równa ilości azotu resztkowego w badanym 1 ml krwi. Aby pokazać ilość azotu w miligramach, wynik należy pomnożyć przez 100.
